(Ċitometrija tal-fluss, FCM) hija analizzatur taċ-ċellula li tkejjel l-intensità tal-fluworexxenza tal-markaturi taċ-ċelluli mtebbgħin. Hija teknoloġija ta 'teknoloġija għolja żviluppata abbażi tal-analiżi u l-issortjar ta' ċelloli singoli. Jista 'jkejjel u jikklassifika malajr id-daqs, l-istruttura interna, id-DNA, l-RNA, il-proteini, l-antiġeni u proprjetajiet fiżiċi jew kimiċi oħra taċ-ċelloli, u jista' jkun ibbażat fuq il-ġbir ta 'dawn il-klassifikazzjonijiet.
Iċ-ċitometru tal-fluss jikkonsisti prinċipalment mill-ħames partijiet li ġejjin:
1 kamra tal-fluss u sistema fluwida
2 sors tad-dawl tal-lejżer u sistema tat-tiswir tar-raġġ
3 Sistema Ottika
4 Elettronika, Ħażna, Wiri u Sistema ta 'Analiżi
5 Sistema ta 'Issortjar taċ-Ċelluli
Fost dawn, l-eċċitazzjoni bil-lejżer fis-sors tad-dawl tal-lejżer u s-sistema li tifforma raġġ hija l-kejl ewlieni tas-sinjali tal-fluworexxenza fiċ-ċitometrija tal-fluss. L-intensità tad-dawl tal-eċċitazzjoni u l-ħin tal-espożizzjoni huma relatati mal-intensità tas-sinjal tal-fluworexxenza. Il-lejżer huwa sors ta 'dawl koerenti li jista' jipprovdi tul ta 'mewġ wieħed, intensità għolja, u illuminazzjoni ta' stabbiltà għolja. Huwa s-sors tad-dawl ideali ta 'eċċitazzjoni biex jissodisfa dawn ir-rekwiżiti.
Hemm żewġ lentijiet ċilindriċi bejn is-sors tal-lejżer u l-kamra tal-fluss. Dawn il-lentijiet jiffokaw raġġ tal-lejżer b'sezzjoni trasversali ċirkolari li toħroġ mis-sors tal-lejżer f'raġġ ellittiku b'sezzjoni trasversali iżgħar (22 μm × 66 μm). L-enerġija tal-lejżer f'dan ir-raġġ ellittiku hija mqassma skond distribuzzjoni normali, li tiżgura intensità ta 'illuminazzjoni konsistenti għaċ-ċelloli li jgħaddu miż-żona ta' sejbien tal-lejżer. Min-naħa l-oħra, is-sistema ottika tikkonsisti minn settijiet multipli ta 'lentijiet, pinholes, u filtri, li jistgħu jinqasmu bejn wieħed u ieħor f'żewġ gruppi:' il fuq u 'l isfel mill-kamra tal-fluss.
Is-sistema ottika quddiem il-kamra tal-fluss tikkonsisti minn lenti u pinhole. Il-funzjoni ewlenija tal-lenti u l-pinhole (ġeneralment żewġ lentijiet u pinhole) hija li tiffoka r-raġġ tal-lejżer b'sezzjoni trasversali ċirkolari emessa mis-sors tal-lejżer f'raġġ ellittiku b'sezzjoni trasversali iżgħar. Dan iqassam l-enerġija tal-lejżer skont distribuzzjoni normali, li tiżgura intensità ta 'illuminazzjoni konsistenti għaċ-ċelloli fiż-żona ta' skoperta tal-lejżer u timminimizza l-interferenza mid-dawl mitluq.
Hemm tliet tipi ewlenin ta 'filtri:
1: filtru tal-pass twil (LPF) - jippermetti biss dawl b'tul ta 'mewġ ogħla minn valur speċifiku li jgħaddi minnu.
2: Filtru tal-pass qasir (SPF) - jippermetti biss dawl b'tul ta 'mewġ taħt valur speċifiku li jgħaddi minnu.
3: Filtru tal-bandpass (BPF) - jippermetti biss li tgħaddi d-dawl f'firxa speċifika ta 'tul ta' mewġ.
Kombinazzjonijiet differenti ta 'filtri jistgħu jidderieġu sinjali ta' fluworexxenza f'tul ta 'mewġ differenti għal tubi fotomultiplier individwali (PMTs). Pereżempju, filtri għall-iskoperta ta 'fluworexxenza ħadra (FITC) quddiem PMT huma LPF550 u BPF525. Il-filtri użati biex jindividwaw il-fluworexxenza oranġjo-aħmar (PE) quddiem il-PMT huma LPF600 u BPF575. Il-filtri għall-iskoperta ta 'fluworexxenza ħamra (Cy5) quddiem il-PMT huma LPF650 u BPF675.
Iċ-ċitometrija tal-fluss tintuża prinċipalment għall-issortjar taċ-ċelloli. Bl-avvanz tat-teknoloġija tal-kompjuter, l-iżvilupp tal-immunoloġija u l-invenzjoni tat-teknoloġija tal-antikorpi monoklonali, l-applikazzjonijiet tagħha fil-bijoloġija, il-mediċina, l-ispiżerija u oqsma oħra qed isiru dejjem aktar mifruxa. Dawn l-applikazzjonijiet jinkludu analiżi tad-dinamika taċ-ċelluli, apoptożi taċ-ċelluli, ittajpjar taċ-ċelluli, dijanjosi tat-tumur, analiżi tal-effikaċja tal-mediċina, eċċ.
POST ĦIN: 21-2023 ta 'Settembru
